Tvärstupet är ett naturreservat beläget i kommunen Borlänge i Dalarnas Län. Reservatet skapades den 15 mars 1976 och förvaltas idag av Länsstyrelsen i Dalarnas län. Med en yta på 39 hektar består reservatet främst av skog med en landyta på 38 hektar.
I reservatet finns även anordningar för information. Men för att minimera störningar på fågellivet är det under perioden 1 mars till 31 juli förbjudet för allmänheten att befinna sig inom någon del av reservatet.
Tvärstupet är känt för sin sydvästra brant ner mot Tvärstupstjärnen. I bergroten finns ett bestånd med lindar och hassel samt andra växter som gynnas av bergets värme. Bland annat kan man hitta getrams, svartbräken och kungsljus här. Reservatet är också känt som ett så kallat sydväxtberg.